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                          沃特世HPLC液相色譜投入使用前的準(zhǔn)備工作,你了解多少?

                          更新時(shí)間:2021-03-26      點(diǎn)擊次數(shù):1391
                             沃特世HPLC液相色譜是一種以液體做流動(dòng)相的用于物質(zhì)分離和檢測(cè)的常用儀器。主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。在工作時(shí),HPLC依靠泵加壓樣品,令其通過(guò)填充有吸附劑的壓力柱,依據(jù)溶質(zhì)在不用溶劑中的溶解度不同而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離的,檢測(cè)器在定性物質(zhì)的同時(shí),可定量測(cè)定各個(gè)成分的比例。
                            沃特世HPLC液相色譜使用前期準(zhǔn)備工作:
                            1.始終保持儀器包括內(nèi)在系統(tǒng)的清潔。
                            2.室內(nèi)溫度始終保持恒定,因?yàn)槭覝氐淖兓瘜?duì)高效液相色譜檢測(cè)器有影響。
                            3.所有溶液、試劑、樣品、標(biāo)準(zhǔn)溶液、注射劑等都應(yīng)事先準(zhǔn)備好。
                            4.提前準(zhǔn)備好備用電源防止停電。
                            沃特世HPLC液相色譜操作流程:
                            1.將已經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相注入儲(chǔ)液罐;
                            2.用流動(dòng)相沖洗金屬過(guò)濾器,然后將過(guò)濾器浸入儲(chǔ)液罐的流動(dòng)相中;
                            3.將儲(chǔ)液罐放置在一定的高度,以避免由于搬運(yùn)和其他操作人員的移動(dòng)而造成不必要的跌落。
                            4.然后按以下順序依次啟動(dòng)高效液相色譜儀:泵→檢測(cè)器→高效液相色譜軟件→按預(yù)先計(jì)劃的方法設(shè)置軟件參數(shù),如分析時(shí)間、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速等。
                            5.啟動(dòng)泵,運(yùn)行5分鐘,主要是為了排除系統(tǒng)中的氣泡,結(jié)束后關(guān)閉所有排氣閥;
                            6.然后按照預(yù)先計(jì)劃的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,運(yùn)行流動(dòng)相,走基線,直到基線平穩(wěn),就可以在計(jì)算機(jī)軟件上進(jìn)行監(jiān)視;
                            7.基線平穩(wěn)后,在軟件中設(shè)置樣品的運(yùn)行參數(shù),如流速和分析時(shí)間等。分析時(shí)間會(huì)因樣品、流速、柱長(zhǎng)等因素變化。
                            8.參數(shù)設(shè)置完畢后,將固定體積的樣品溶液注入進(jìn)樣閥,然后在軟件中啟動(dòng)注入命令,進(jìn)樣器中的樣品溶液就隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱;
                            9.通過(guò)軟件監(jiān)視各項(xiàng)讀數(shù),當(dāng)檢測(cè)器檢測(cè)到樣品所有峰值,停止運(yùn)行并設(shè)置新的進(jìn)樣。在下一個(gè)樣品分析前,建議留出5-10分鐘,待流動(dòng)相通過(guò)色譜柱,以便清洗之前樣品的殘留物;確認(rèn)基線穩(wěn)定后,進(jìn)行下一次注射。
                            10.分析結(jié)束后,先關(guān)閉檢測(cè)器,然后關(guān)閉泵,后關(guān)閉軟件。
                            沃特世HPLC液相色譜廣泛應(yīng)用在有機(jī)化工、生物醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。
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